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淺述成像流式細胞儀工作的具體過程

更新時間:2022-08-11      點擊次數(shù):1628
  成像流式細胞儀是將待測細胞或微粒進行熒光染色后制成懸液標(biāo)本,在一定氣體壓力下將待測樣品壓入流動室,用不含細胞或微粒的緩沖液(又稱鞘液)在高壓下從鞘液管噴出,鞘液管入口方向與待測細胞或微粒流成一定角度,使鞘液包繞著細胞或微粒高速流動,形成一個圓形的流束(即鞘流),待測細胞在鞘液的包裹下單行排列,依次通過流式細胞儀的檢測區(qū)域,經(jīng)激發(fā)光激發(fā)后產(chǎn)生熒光信號。
  成像流式細胞儀工作過程:
  開始使用流式細胞儀,第一步是準(zhǔn)備要分析的樣品。從細胞培養(yǎng)物,血液或分解的組織中獲得的細胞應(yīng)制成懸浮液。將該細胞懸浮液分成數(shù)個試管進行染色,保留未染色細胞作為對照。通過添加標(biāo)記有熒光探針的抗體或染色細胞成分的染料對其他細胞樣品染色。分析細胞內(nèi)蛋白質(zhì)時,首先必須將細胞固定(使用福爾馬林緩沖液)并進行透化(使用透化劑),以使抗體和染料進入細胞。細胞與抗體或染料孵育后,將細胞在緩沖液中洗滌,然后重懸在基于鹽的緩沖液中進行分析。然后將準(zhǔn)備好的樣品引入流式細胞儀。
  成像流式細胞儀有三個主要組成部分:液流系統(tǒng),光學(xué)系統(tǒng)和電子系統(tǒng)。在流式細胞儀的中心部分,流通池中樣品材料遇到激發(fā)光并散射光,隨后該光被檢測系統(tǒng)讀取和記錄。既具備流式細胞術(shù)的速度、靈敏度和分型能力,也具備顯微鏡的清晰圖像和有效洞察力功能。
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